应用酸度计测定稻谷脂肪酸值的方法探讨

应用酸度计测定稻谷脂肪酸值的方法探讨
摘要：针对稻谷脂肪酸值测定过程中手工操作为主，终点判定时个人误差大、重现性差的问题，采用酸度计对稻谷脂肪酸值 进行测定，结果表明，测定结果相对偏差较小，重复性、准确性较好。 关键词：稻谷；脂肪酸值；酸度计；酚酞；变色范围 中图分类号：TS210．1 文献标识码：A 文章编号：1003—6202(2007)07—0007—02 稻谷脂肪酸值是判定储存稻谷质量品质的重要指标。 “国粮发[2004]43号《关于印发稻谷和玉米储存品质判定规 则的通知》”中规定了稻谷脂肪酸值的测定方法。但在实际 的检测工作中发现，由于稻谷本身的特性，稻谷试样的提取 液中加入蒸馏水后，形成一种乳白色的胶体溶液，在滴定终 点时指示剂的颜色变化较难判断。当看到溶液颜色有明显 变化时，特别是变化到判定规则描述的“滴定至微红色，30 S 不消褪为止”时，早已过了滴定终点。若此时读数，则会产生 较大的终点判断误差，从而导致测定结果的误差。而用酸度 计根据滴定至等当点时pH值突跃来确定终点比用指示剂颜 色变化来判定终点具有较好的测定重复性、准确性 J，解决 了终点判定的问题。水分测定仪| 浊度计| 色度计| 粘度计| 折射计| 滴定仪| 密度计| 热流计| 浓度计| 折射仪| 采样仪|

1 原理 在室温下用无水乙醇提取稻谷中的脂肪酸，以pH玻璃 电极为指示电极，饱和甘汞电极作参比电极，用酸度计指示 溶液的pH值，以标准氢氧化钾一95％ 乙醇标准溶液滴定试 液，pH8．0为终点，根据氢氧化钾溶液的用量计算试样的脂 肪酸值。

2 试剂 无水乙醇，AR；不含CO 的蒸馏水：将蒸馏水烧沸，加盖 冷却；氢氧化钾一95％ 乙醇(中性)标准滴定溶液： 0．010 21 mol／L；pH4．00标准缓冲溶液(20％)；pH6．88标准 缓冲溶液(2o~c)。

3 仪器与设备 JJ一200型电子天平；HY一4A数显调速多用振荡器； CLS．JLG一1型砻谷机；FSJ—I型粮食试验粉碎机；PHS一25 型酸度计；79—3型磁力搅拌器；具塞磨口锥形瓶：250 ml；移 液管：50．0 ml、25．0 ml；微量滴定管：5 ml，最小刻度为 0．02 mol／L；烧杯：150 ml；量筒：50 ml；比色管：50 ml；玻璃短 颈漏斗；中速定性滤纸。

4 酸度计的校准 按照酸度计的使用说明，用标准缓冲溶液校正酸度计， 使其处于工作状态以备用；每次测定完毕后，将电极及磁力 搅拌子用滤纸吸干以备用。

5 样品制备与处理 取混合均匀样品，用实验砻谷机脱壳。取混合均匀的糙 米约80 g，用试验粉碎机粉碎，粉碎样品充分混合后装入磨 口瓶中备用。 称取制备试样10 g(精确到0．001 g)，于250 ml具塞磨 口瓶中，并用移液管准确加入50．0 ml无水乙醇，置往返式振 荡器上振摇10 min，振荡频率为100~．／min；静置1～2 min， 在玻璃漏斗中放人折叠式滤纸过滤，并加盖滤纸；弃去最初 几滴滤液，收集滤液25 rrIl以上。

6 测定 精确移取25．0 ml滤液于150 ml烧杯中，加50 ml不含 CO 的蒸馏水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钾一95％ 乙醇(中 性)标准溶液滴定至酸度计指示pH8．0，记下耗用的氢氧化 钾一95％ 乙醇溶液体积。空白试验以25．0 ml无水乙醇代替 上述样品滤液进行试验，并记下耗用的氢氧化钾一95％ 乙醇 溶液体积。

7 结果与讨论 采用本方法与《关于印发稻谷和玉米储存品质判定规则 的通知》附录A中的方法对韶关市直属粮食储备库收购的 2005年早籼稻进行检测，每份试样取2个平行样进行测定， 以其算术平均值为测定结果。试验数据见表1、表2。 表1 采用酸度计平行测定稻谷脂肪酸值 mg K0H／100 g 项目 —1———2————3——型 4 室 墼 5———6———7———8一平l 均值L￡L 14．2 14．4 14．8 15．1 14．6 15．0 15．2 14．9 14．8 0．6 0．4 0 0．3 0．2 0．2 0．4 0．1 2．2 测定结果 绝对偏差 表2 采用国粮发[2004]43号附录A中方法 测定稻谷脂肪酸值 mg KOH／100 g 项目 — 警— 丁 绝对偏差0．5 0．3 0．2 0．1 0．2 0．3 0．7 0．6 平均值 14．9 2．9 y=0．891 5x+71．378 R =0．737 3 y-0．8,51 7x～46．423 R =0．534．9 0 100 2()0 300 4I 500 PPO活性／A(min．g)一’ 一方法二与方法三的相关性 I I-方法二与方法一的相关性 图4 三种方法所测小麦PPO活性的相关分析 6oo 竺500 g 400 ≤ 300 薹zo0 2 o0 0 150 250 350 450 PPO活性／A(min．g)～’ 图5 方法三3次重复间的相关性 PPO活性／A(min·g) 司红起等：小麦多酚氧化酶活性检测方法的比较分析／2007年靠7期 图6 方法三与方法二的相关分析 ’ f 其粗酶液浓度太低和底物浓度较高也是造成所测吸光度值 低的原因。若用全麦粉计算粗酶液的浓度，则方法一中粗酶 液浓度为0．5÷5÷[1+(1+2)÷0．25]=0．008 g／ml，方法 二和方法三中粗酶液浓度为0．3÷7．5：0．04 g／ml，后者为 前者的5倍。方法一中底物浓度为0．1÷(1+2+0．25)= 0．03 mol／L，方法二和方法三底物浓度为0．O1 mol／L。底物 浓度与粗酶液浓度的比值，方法一是方法二和方法三的 15倍。方法二和方法三所测的小麦PPO活性品种间差异极 显著，且重复性好，误差小。方法二中所用的底物L-DOPA 难溶于水，且试剂昂贵；方法三中所用的底物邻苯二酚易溶 于水，且试剂价格远低于L-DOPA；方法三与方法二所测的小 麦PPO活性呈极显著正相关。所以方法三是一种成本较低 的小麦PPO活性批量检测方法。