毛细管电泳的分离模式与仪器要求

毛细管电泳的分离模式与仪器要求

IC 主要有三种分离方式，即高效离子交换色谱（简称HPIC）、离子排斥色谱（简称HPICE）和离子对色谱（简称MPIC）。用于三种分离方式的柱填料的树脂骨架基本上都是苯乙烯／二乙烯基苯的共聚物，但树脂的离子交换容量各不相同。HPIC用低容量的离子交换树脂（0.01～0.05mmol / g ) , HPICE 用高容量离子交换树脂（3～5mmol / g ) , MPIC 用不含离子交换基团的多孔树脂。三种分离方式各基于不同的分离机理。HPIC 的分离机理主要是离子交换，用于F^-，Cl^-，NO3^-，SO₄^2-，Na ⁺ , NH₄⁺，K ⁺ , Mg²⁺ , Ca²⁺ , Fe^{3 +} , Zn²⁺ , Ni²⁺等无机阴，阳离子、多价阴离子和碳水化合物等的分离，HPICE 主要是利用离子排斥机理，用于有机酸，无机弱酸和醇类的分离。而MPIC 则主要基于吸附和离子对的形成，主要用于疏水性阴、阳离子的分离，以及金属络合物的分离。本节将对应用较多的HPIC 和HPICE 两种分离方法的机理进行讨论。多用表| 验电笔| 示波表| 电流表| 钩表| 测试器| 电力计| 电力测量仪| 光度计| 电压计| 电流计|
　　（a）HPIC 的分离机理
　　HPIC 的分离机理主要是离子交换。若将含有阴离子混合物A^-、B^-和C^-的样品溶液进入阴离子交换分离柱，A^-、B^-和C^-与淋洗液中的淋洗离子E^-将有下述离子交换平衡：

其交换平衡常数（K 气也称选择性系数）为：

式中，s为样品离子或淋洗离子在固定相的浓度，m为样品或淋洗离子在可动相的浓度。样品阴离子的浓度通常小于树脂总容量的2% ，因此树脂上的平衡阴离子主要是淋洗离子E^-，则可将[E^-]_s，项视为树脂的交换容量，[E^-]_m可视为淋洗液的浓度，则对一个具体淋洗体系而言， [E^-]_m/ [E^-]_s为常数。 [A ^-]_s/ [A^-]_m项为阴离子A^-在固定相和可动相之间的分配系数K ，则K¹=K_x 常数。不同离子，由于其离子电荷，离子半径，疏水性等不同，K 亦不同，K¹越大，移动速度越慢，反之亦然。设混合物中各组分K¹值大小的顺序为K¹A < K¹B < K¹C，各组分与离子交换树脂反复发生多次交换平衡，混合物将按A^-、B^-、C^-的顺序将先后流出色谱柱，并依次流经检测器，在记录仪上得到色谱分离图，见下图，以保留时间定性、峰高或峰面积定量。