磁式细胞分选器简介

磁式细胞分选器简介
FCM虽然是分离复杂细胞群中特定细胞的有效方法，但也有细胞处理量小，含量低于10-4的痕量细胞不能分离，并且费用较高等不足之处。目前市场上出现T 一种称为磁式细胞分选器（magnetic activated cell sorting , MACS）的装置，可作为细胞分析的预富集手段或FCM替代产品，价格便宜，使用方便，适宜于小型实验室配置使用。下图分别是MACS的外形和分选工作原理。

　　MACS的分离效果已经得到了免疫荧光、PCR、FISH及FCM的确认，其原理是通过抗体对细胞膜表面抗原的特异性识别，将偶联在抗体上的磁珠标记在细胞上，再在外在磁场作用下以正选或负选方式选择性地分离细胞。其分离策略可以叙述如下。  滴定仪| 密度计| 热流计| 浓度计| 折射仪| 采样仪|
　　1 ．磁珠标记
　　将带有磁珠的抗体快速和目的细胞的特殊表面抗原结合上去。
　　2 ．过柱分离
　　将处理过的细胞样品流经MACS分离柱，未经标记的细胞流出分离柱（负选），而标记上磁珠的目的细胞则被外加磁场吸附在柱内。
　　3 ．洗脱细胞
　　撤去外加磁场洗脱收集柱内的细胞，即为正选的目的细胞。
　　此法的的特点及优点是适应细胞种类广，既可用于收集高含量的细胞也可用于富集痕量细胞（如抗原特异的B细胞、母亲血液中的胎儿细胞、外周血中的造血干细胞和血液中的肿瘤细胞等），分离纯度可高达95%～99%，细胞处理量可高达109。而最大优点是磁珠不会影响细胞活力。其原因是MACS磁珠直径仅50nm，相当于一个病毒粒子大小，只有真核细胞的百万分之一。更为重要的是，MACS磁珠能形成稳定的胶体溶液，在磁场中既不沉淀，也不聚合，而且作为磁珠成分的铁氧化物和多糖能被细胞所降解，使细胞保持生理活性。细胞分离后磁珠一也无需去除。
　　细胞分选可以是正选、负选或正负选结合。正选就是让目的细胞带上磁珠，直接分离而得，此法快速也相对省钱；负选就是让非目的细胞带上标记，收集未标记细胞。负选一般只在无适当抗体或抗体会影响细胞时才采用。正负选结合方法适用于分离细胞数极少或含有与其他非目的细胞相同表面抗原的细胞。