高效液相色谱仪的等强度洗脱和梯度洗脱系统

高效液相色谱仪的等强度洗脱和梯度洗脱系统
高效液相色谱仪是一个强有力的分离分析工具。但是，作为洗脱用流动相并不单纯是一种溶剂，而由两种或两种以上的溶剂（或缓冲液）以不同百分比组合而成。例如：甲醇-水、乙腈-水、乙腈一磷酸缓冲液和己烷-乙酸乙酯等等，以不同百分比混合组成流动相。如果在洗脱过程中溶剂的混合组成不变，就称作等强度洗脱，即溶剂强度保持不变。如果在洗脱过程中溶剂的混合组成随时间变化的，称作梯度洗脱。依照溶剂强度随时间变化的梯度洗脱技术在液相色谱中是十分有用的。不少难分离的物质对以及极性相差较大的混合物需要依靠梯度洗脱得到分离。下图示出三元溶剂梯度洗脱系统。

　　单台高压泵通过比例阀与三个溶剂贮器相连，按照预先设计的梯度程序由梯度程序仪按不同时间发出指令，通过阀驱动器控制三个比例阀按不同的时间间隔开闭。换句话说，高压泵从三个溶剂贮器的溶剂吸入量是随比例阀开闭时间长短而不同，集中到混合器后构成了混合溶剂强度随时间变化的曲线，即梯度洗脱曲线。△t1，△t2和△t3分别代表三个比例阀的启开时间间隔，如果泵的流速不变，则某一贮器内溶剂抽提的百分数如下式所示：

　　双泵二元梯度洗脱系统（下图）是通过高压泵改变驱动速度，使得两种溶剂的吸入量随时间而变化，经过混合器，其混合溶剂强度随时间而变化。此时，某一贮器内溶剂抽提的百分数可由下式表示。

式中F1、F2为两个高压泵各自的流量。